Das Krankenhaus Santo Spirito - Heilig Geist - um das herum sich das gleichnamige Stadtviertel entwickelte, ist das älteste Spital der Stadt. Es geht auf das Jahr 727 zurück, als der Sachsenkönig Ina es errichten ließ, um den Pilgern seines Stammes Hilfe zu leisten. Es wurde ein erstes Mal im Jahre 1024 von Papst Innozenz III wiederhergestellt, der es dem Heilig-Geist-Orden unterstellte, der Guido von Montpellier in Frankreich gegründet worden war; ein vollständiger Neubau erfolgte unter Sixtus IV.

Der Entwurf war von Baccio Pontelli, demselben Architekten, der bei dem Bau der anderen Werke mitarbeitete, die während des Pontifikats dieses wohl zu recht als erster Renaissancepapst geltenden Kirchenoberhauptes entstanden. Die Corsia Sistina, ein 120 m langer Flügel auf der Seite zum Borgo Santo Spirito ist aus Ziegelsteinen, und der Portikus aus achteckigen Pfeilern wurde im 17. Jh. zugemauert.
In der Mitte des Flügels befindet sich ein achteckiger Vorbau mit zwei- und dreibogigen Fenstern, der die beiden Innenräume voneinander trennt: die Sala Lancisi und die Sala Baglivi, die im 15. Jh. von umbrischen Künstlern mit Fresken ausgemalt wurden.
Das Krankenhaus galt als städtische Institution und war vollständig autonom, unterstand nur der Aufsicht des Papstes; es diente der Pflege der Kranken und der Aufnahme ausgesetzter Kinder, und der Betrieb folgte dem ältesten bekannten Regelbuch für eine Krankenhaus: dem Liber Regulae.
Das Rad für die anonyme Aufnahme der Neugeborenen, das natürlich nicht mehr als solches benutzt wird, ist das einzige Beispiel für eine solche Einrichtung, das sich in Rom erhalten hat.